Les communications du workshop 'Biotechnologies au Maroc', Settat 2005, thème 'Biotechnologies et santé au Maroc' avaient couvert plusieurs sujets dont les papillomavirus humains et le cancer du col de l'utérus, l'équilibre glycémique des enfants diabétiques, effet d'un hypolipémiant,le ciprofibrate sur le métabolisme cellulaire, les anticorps monoclonaux et la cytotoxicité des huiles essentielles de Rosmarinus officinalis et de Mentha pulegium.
Apport de la biologie Moléculaire dans la détection du Virus du Papillome Humain " HPV" associé au cancer du col de l'utérus
M.MEFTAH
EL KHAIR, R. AIT MHAND & MM. ENNAJI
Laboratoire de virologie UER " Microbiologie & Hygiène et Virologie
", UFR " Environnement & Santé ", Faculté
des Sciences et Techniques -Mohammedia. Université Hassan II -
Mohammedia, BP 146, quartier Yasmina (20650) FST Mohammedia
Le cancer du col utérin est un véritable problème de
santé publique, étant donné qu'il constitue la deuxième
cause de mortalité à l'échelle mondiale en particulier
dans les pays en voie de développement. L'infection par des papillomavirus
humains (HPV) de types oncogènes est une cause nécessaire
pour la genèse du cancer du col utérin.
L'amplification par la Réaction de Polymérisation en Chaîne
(PCR) est parmi les méthodes les plus sensibles pour la détection
des HPV oncogéniques, en particulier le HPV type16 (70- 80% carcinomes
épidermoïdes) et le HPV type 18 (Plus de 50% des adénocarcinomes)
qui sont les plus incriminés dans la genèse des cancers
de la sphère ano-génitale, notamment le cancer du col utérin.
Dans notre étude, nous avons voulu établir une détection
Moléculaire du HPV, en vue d'une contribution à l'amélioration
d'un diagnostic rapide et d' un dépistage précoce des lésions
précancéreuses du col utérin. Pour ce, 20 biopsies
à date ont été récupérées et
analysées pour l'absence ou la présence de l'HPV.
Les résultats obtenus ont montré après extraction
du matériel génétique, par la méthode classique
phénol-chloroforme et amplification génique par PCR à
l'aide des amorces universelles MY09 /MY11, la présence de ce virus
dans la moitié des échantillons analysés.
L'infection cervicale à HPV est fréquente au Maroc, par
ailleurs, le transfert de cette technologie aux laboratoires d'analyses
médicales et d'anatomopathologie, va contribuer à la détection
précoce des HPV associés au cancer du col utérin
chez des patientes " dites à
risques ", susceptibles de développer une lésion cancéreuse.
Ce projet est soutenu financièrement par les projets PARS et PROTARS
(CNRST-Rabat)
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Surveillance de L'équilibre glycémique et du risque cardiovasculaire chez des enfants diabétiques suivis à l'Institut Pasteur du Maroc
H. MOHAMMADI 1 ; F.QARBAL 1; A. BELHOUARI 3 ; L. HILAL2; A. BELLIK 1 ; A.
EL MALKI 1; N. DERSI 1 ; M. HASSAR1 ; N. GHALIM 1.
1 - Laboratoire de Biochimie, Institut Pasteur du Maroc- Casablanca
2 - Laboratoire de génétique et Biologie Moléculaire,
Faculté des Sciences Kenitra
3 - Laboratoire de Biologie, Faculté des sciences Ben M'sik Casablanca
Le diabète de type 1 est une maladie auto-immune définie par
un désordre du métabolisme glucidique et lipidique. Notre
étude a été effectuée sur 100 enfants diabétiques
âgés de 3 à 18 ans recrutés au niveau de l'association
ONA des jeunes diabétiques de Casablanca, Le suivi de ces enfants
a été réalisé sur une période de 4
ans.
Nous avons apprécié le contrôle de l'équilibre
glycémique par la détermination de l'hémoglobine
glycosylée (HbA1c) qui représente un paramètre essentiel
dans la surveillance des diabétiques et le dosage du cholestérol
total, des triglycérides, du cho-HDL, du cho-LDL, pour apprécier
le risque cardio-vasculaire chez ces enfants diabétiques.
La technique utilisée pour le dosage de l'HbA1c est la chromatographie
échangeuse de cations, les paramètres lipidiques ont été
évalués par méthode colorimétrique.
Nos travaux ont montré que ces enfants peuvent être répartis
en quatre stades selon le pourcentage de l'HbA1c. Nous avons obtenus une
population légèrement hétérogène dont
50 % font partie du stade IV (HbA1c moyenne = 11 %), 40 % du stade III
(HbA1c moyenne = 9 %), 8 % du stade II (HbA1c moyenne = 7 %) et 2 % du
stade I (HbA1c moyenne = 5 %).
La population étudiée présente également une
augmentation du cholestérol total (3.7 %), des Triglycérides
(14 %), du cho-LDL(10 %) et une diminution du cho- HDL ( 7.8 % ) par rapport
à une population témoin.
Nos résultats montrent un déséquilibre Lipidique
des enfants diabétiques en faveur d'une prédisposition à
un risque cardio-vasculaire, ces résultats doivent êtres
complétés par des tests génétiques.
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Impact
du Ciprofibrate sur le métabolisme cellulaire : Effets sur la ß-hydroxybutyrate
déshydrogénase (Enzyme des corps cétoniques)
D.
MOUNTASSIF1, M. KABINE1, N. LATRUFFE2 ET M. S. KEBBAJ 1
1
Laboratoire de Biochimie, Faculté des Sciences, Université
Hassan II-Aïn Chock, km 8 route d'El Jadida BP. 5366,
Casablanca, Morocco.
2 LBMC, Faculté des Sciences, 6 Bd Gabriel, Université de
Bourgogne, 21000 Dijon cedex, France.
Les
mitochondries représentent la centrale énergétique
de la cellule et le siège de la production des corps cétoniques
(principalement le ß-hydroxybutyrate et l'acétoacétate)
qui jouent un rôle important dans le métabolisme énergétique
et la biosynthèse cellulaire. Ces corps cétoniques sont
les produits finaux de la dégradation des acides gras et leur production
est régulée par la ß-hydroxybutyrate déshydrogénase
(BDH) (EC 1.1.1.30) : oxydo-réductase à NAD (H), située
au niveau de la membrane interne mitochondriale.
Dans ce travail, nous avons étudié l'effet d'un hypolipémiant
: le ciprofibrate (principe actif du médicament "Lipanor"
utilisé dans les cas des dyslipidémies) sur les enzymes
du métabolisme cellulaire, surtout sur l'activité de la
BDH et par la suite la détermination du site de son action et ceci
à la fois au niveau des mitochondries lourdes (de grande taille)
et légères (de petite taille) du foie de la gerboise (Jaculus
orientalis) - rongeur vivant dans l'étage semi-aride du Maroc oriental
- qui présente la capacité - après ingestion du médicament
- de ne pas développer une hépatomégalie (augmentation
de la taille du foie par prolifération peroxysomale donnant par
la suite une tumeur) contrairement au rat et l'homme.
Les résultats ont montré in vivo, un effet très significaif
du ciprofibrate sur les biomarqueurs subcellulaires et du stress oxydatif.
In vitro, un effet inhibiteur de la BDH des deux populations mitochondriales
a été observé et cette inhibition se produit au niveau
du site actif de la BDH provoquant ainsi un dérèglement
dans le métabolisme des corps cétoniques qui représentent
les principaux combustibles utilisés par le cerveau.
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Etude
des propriétés ionophoriques de l'atropine: Complexation et
transport à travers un modèle membranaire des ions Na+, K+
, Ca2+ et Mg2+
L.RABI, A. MOUTAOUAKIL & BLAGHEN
Unité
de Bio-industrie et Toxicologie Moléculaire, Laboratoire de Microbiologie,
Biotechnologie et Environnement, Université Hassan II, Faculté
des sciences Aïn chock, Km 8 route d'El Jadida BP 5366 Maârif,
Casablanca
Nous reportons l'activité de l'atropine (un alcaloïde monocyclique
fortement toxique, et qui cause des morts une fois ingéré
en même quantité modérée) sur la complexation
et le transport à travers un modèle membranaire des ions
Na+ et K+, Ca2+ et Mg2+. L'atropine composé monocyclique s'est
révélé capable d'extraire et de transférer
des ions Na+ et K+, Ca2+ et Mg2+ d'une phase aqueuse vers une autre organique
; ainsi, l'étude cinétique du transport à travers
le modèle membranaire varie d'un ion à un autre et que le
flux de transport de ces ions dépend de la concentration de l'atropine.
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Production d'un nouveau réactif monoclonal anti-B
F.
SADIQ 1,2, A. TISSENT 1,2, N. HABTI 1, D. RADALLAH 2, N. BENCHEMSI 1.
1-
Laboratoire de Génie génétique et Cellulaire. Service
d'Hématologie. Faculté de Médecine et de Pharmacie.
Casablanca. MAROC. Fouad-sadiq@hotmail.com
2- Laboratoire de Biologie et Physiologie Cellulaire. Faculté des
Sciences Ben M'sik. Casablanca. MAROC
Les anticorps monoclonaux sont des outils performants dans la recherche surtout
en immunologie Moléculaire et cellulaire. Ils ont remplacé
les anticorps polyclonaux dans l'identification des groupes sanguins et
la détection des marqueurs cellulaires et des agents pathogènes.
Le but de ce travail est de produire un anticorps monoclonal identifiant
les groupes sanguins ABO. La technique des hybridomes a été
appliquée.
Une souris femelle Balb/c a été immunisée intrapéritonéalement
avec des hématies humains de groupe B. Les splénocytes ont
été fusionnés avec les cellules myélomateuses
P3X63Ag8 selon le protocole modifié de Galfré et al. L'identification
des anticorps monoclonaux a été réalisée par
hémagglutination avec des hématies B traitées par
la broméline. Un anticorps monoclonal anti-B (A22.10) a été
sélectionné et évalué pour son utilisation
dans la fabrication d'un réactif anti-B. L'anticorps A22.10 agglutine
exclusivement les hématies B et AB. Il ne reconnaît pas les
hématies A et O.
L'anticorps monoclonal A22.10 peut être utilisé dans le groupage
sanguin en identifiant le système ABH. Il présente un intérêt
dans des études de la cartographie épitopique des antigènes
B. Il peut aussi être utile en étudiant leur expression en
cancer.
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Activité
antimoisissures et antimycotoxines de l'algue brune marine Cystoseira
tamariscifolia
Z. SOUHAILI 1.,M. FAID 2, M. LAGZOULI 1
1. Service de chimie-biochimie faculté de médecine et de pharmacie,
Casablanca, e- mail: z.souhaili@caramail.com
2. Département de microbiologie et biotechnologie alimentaire,
IAV Hassan II, Rabat
Cystoseira
tamariscifolia est une algue brune marine endémique du Maroc, elle
est très répandue sur la cotes atlantique marocaine, pourtant
cette algue n'a suscité que peu l'intérêt des chercheurs
par rapport à d'autres algues brunes de son genre, c'est dans cet
objectif que notre étude a été effectuée dans
un but de valorisation de l'algue Cystoseira tamariscifolia par la recherche
de nouvelles substances naturelles biologiquement actives pour une éventuelle
utilisation dans le domaine pharmacologique et/ou biotechnologique.
Dans ce travail, nous avons étudié l'activité antimoisissures
et antimycotoxines de l'algue brune marine Cystoseira tamariscifolia.
L'algue a été extraite par le méthanol, l'éthanol,
l'hexane et l'eau. Les quatre extraits ont été testés
contre certaines espèces de moisissures à savoir : Aspergillus
niger, Aspergillus flavus, Aspergillus sp et Penicillium sp sur milieux
de culture solides et milieux liquides. L'extrait éthanolique a
été aussi testé contre la production d'aflatoxines
par l'espèce fongique Aspergillus flavus.
Nous avons trouvé que seul l'extrait éthanolique possède
un net effet antifongique sur les espèces de moisissures étudiées
à des concentrations qui varient de 7.5 à 10% et qu'à
partir de 1% cet extrait présente un effet inhibiteur sur la production
d'aflatoxines B2 par l'espèce Aspergillus flavus.
Production
d'un anticorps monoclonal humain anti-AB
A. TISSENT1,2, F. SADIQ 1,2, N. HABTI 1, N. EL AMRANI 2, N. BENCHEMSI 1.
1-Laboratoire de génie génétique et cellulaire, Faculté
de Médecine et de Pharmacie de Casablanca
2- Laboratoire de Biologie et Physiologie Cellulaires, Faculté
des Sciences II Ben M'sik Casablanca. E-mail : atissent@hotmail.com
La
production des anticorps monoclonaux a un impact important en immunohématologie.
La majeure partie des anticorps monoclonaux sont d'origine murine. Ils
sont obtenus par la technique des hybridomes. Cependant cette technique
ne permet pas l'obtention des anticorps monoclonaux anti-Rh. L'alternative
est la technique de la transformation des lymphocytes humains par le virus
d'Epstein Barr (EBV).
Le but de ce travail est de produire des anticorps monoclonaux humains
de groupages sanguins anti-Rh et anti-ABO.
Les prélèvements sanguins sont obtenus à partir de
femmes immunisées. Les lymphocytes sont ensuite séparés
des autres éléments figurés du sang sur un gradient
de densité, et transformés par l'EBV. La transformation
des lymphocytes est observée entre la 4ème et la 6ème
semaine.
Seize transformations ont été réalisées. Seul
un clone nommé 7JP3 sécrétant un anticorps anti-AB
nommé 7JP à été obtenu et stabilisé
par fusion avec des cellules myélomateuses murines P3X63Ag8 selon
la technique des hybridomes puis clonés par dilution limite. L'anticorps
humain sécrété reste stable plus de 6 mois. Il reconnaît
spécifiquement tous les groupes A1, A2, B, A1B, et A2B. En outre
il présente une réactivité intéressante vis
à vis des groupes faibles, notamment le groupe Ax. La comparaison
de la réactivité de cet anticorps à d'autres anticorps
monoclonaux anti-AB vis à vis de 20.000 donneurs de sang et de
plus de 3.000 malades présentant différentes pathologies
n'a montré aucune discordance.
L'anticorps 7JP peut être utilisé comme un réactif
pour la détermination des groupes sanguins ABO et l'étude
des épitopes de l'antigène AB.
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Association
des gènes TNF avec la maladie de Behçet dans la population
marocaine
M.WAJIH1,
L.BOUQBIS1, S.CHADLI1, F.CHOUKRI2, O.AKHAYAT1 et H.IZAABEL1
1 Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté
des Sciences, Université Ibn Zohr Agadir
2 Faculté des Sciences Ben M'sik, Casablanca.
La maladie de Behçet est une affection inflammatoire caractérisée
par une aphtose bucco-génitale associée de façon
variable à des manifestations systémiques, le plus souvent
oculaires, cutanées ou articulaires. La pathogénie de la
maladie est méconnue, cependant les données épidémiologiques
et cliniques sont en faveur d'une intervention des facteurs environnementaux
et génétiques. Dans le but de déterminer les gènes
de susceptibilités aux maladies autoimmunes telles que la Behçet,
les études s'intéressent à l'analyse de l'association
marqueurs-maladies. Le complexe majeur d'histocompatibilité (CMH)
ou région HLA, est le plus polymorphe des systèmes génétiques
humains. Cette région se trouve fréquemment associée
aux maladies autoimmunes du faite de l'importance que jouent certains
de ses gènes dans la réponse immunitaire.
Les gènes du Facteur de Nécrose Tumorale (TNF et TNF ),
qui codent pour des cytokines, impliquées dans les phénomènes
inflammatoires et situés dans la région HLA classe III,
sont parmi les gènes candidats intervenants dans la pathogénicité
des maladies autoimmune en générale et la maladie de <behçet
en particulier.
Notre travail a porté sur l'étude d'association de ces gènes
avec la maladie de Behçet dans la population marocaine. Nous avons
analysé deux marqueurs bialléliques (ou SNPs) par la la
technique PCR-RFLP:
" Un polymorphisme biallélique localisé -308 pb dans
la région promotrice du gène TNF .
" Un polymorphisme biallélique situé à +252
pb dans le premier intron du gène TNF .
Notre étude cas-témoins a porté sur 89 patients et
91 individus sains. Les résultats nous ont permis de révéler
une association de ces marqueurs avec la maladie de behçet dans
notre échantillon. Les deux loci sont en déséquilibre
de liaison et l'haplotype TNF *2 -TNF *2 ainsi que le génotype
TNF *2/2, sont significativement associés à une protection.
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Etude
de la cytotoxicité des huiles essentielles de Rosmarinus officinalis
et de Mentha pulegium
K. MOUNCHID1, F. SADIQ2, A. TISSENT2, N. HABTI2, T. ABOUSSAOUIRA 1, A. RACHIDAI
3, M. ALAOUIl-ISMAILI 4, A. TANTAOUI-ELARAKI 5.
1. Laboratoire d'Histologie-Embryologie. Faculté de Médecine
et de Pharmacie. Casablanca.
2. Laboratoire de Génie génétique et Culture cellulaire.
Faculté de Médecine et de Pharmacie. Casablanca.
3. Laboratoire d'Agrophysiologie et Culture In Vitro. Faculté des
Sciences. Kenitra.
4. Laboratoire de Biochimie. Institut Agronomique et Vétérinaire.
Rabat.
5. Laboratoire de Microbiologie. Institut Sup-Agro. Casablanca.
Le but de ce travail est d'étudier l'effet cytotoxique des huiles
essentielles de Rosmarinus officinalis et de Mentha pulegium sur les cellules
de myélomes P3X63Ag8. Les huiles essentielles ont été
extraites par hydrodistillation à partir de plantes récoltées
au sud du Maroc. L'analyse de la composition chimique de ces huiles essentielles
a été effectuée par CPG et la cytotoxicité
a été déterminée par le test de viabilité
cellulaire. Les altérations cellulaires ont été recherchées
au niveau des cellules après coloration par May-Grunwald-Giemsa.
Nos résultats ont montré que les constituants majoritaires
de l'huile essentielle de Rosmarinus officinalis sont le 1,8-cinéole
(42%), le ?-pinène (11,92%) et le camphre (13,99%). Le constituant
majoritaire de l'huile essentielle de Mentha pulegium est la R-(+)-pulégone
(82%). Le test de viabilité cellulaire a montré un effet
cytotoxique des huiles essentielles de Rosmarinus officinalis et de Mentha
pulegium sur les cellules tumorales. L'étude de la morphologie
des cellules tumorales traitées a révélé une
lyse cellulaire avec éclatement membranaire, une hypertrophie cellulaire
et une condensation de la chromatine.
Cette étude démontre une cytotoxicité des huiles
essentielles de Rosmarinus officinalis et de Mentha pulegium sur des cellules
tumorales (myélome P3X63Ag8) en agissant sur leurs membranes. D'autres
études sont nécessaires pour rechercher l'effet des ces
huiles essentielles sur le cycle cellulaire.
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Prostratine,
molécule candidate contre VIH
A.
ECH-CHAHAD1, G. APPENDINO2, L. BOUYAZZA1
1. UFR Pharmacologie, Pharmacochimie et Biochimie, FST Settat Maroc.
2. Facoltà di farmacia DESCAF Italia.
E-mail: Echchahad@hotmail.com
Le prostratine est un dérivé du 12-deoxyphorbol-13-acétate
qui présente une activité antivirale intrinsèque
contre HIV. Le prostratine induit une expression de la forme provirale
latente qui le rend un composé unique et de grande importance dans
le domaine biomédical. Le prostratine est contenu en état
de trace dans la mamala (Omalanthus nutans) qui est une plante endémique
qui appartient à la famille de l'Euphorbiaceaes. Le but de ce travail
est de produire le prostratine par semi-synthèse à partir
du 12-deoxyphorbol extraite du latex d'Euphorbia resinifera récoltée
au Maroc.
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développement
des biocapteurs basés sur la microbalance à quartz modifiée
par le transfert des films de Langmuir-Blodgett de l'immunoglobuline G/amphiphile
A. JBARI(1), L. BELLARBI(1), A. ERRACHID(2), N. ZINE(2) , M. LOTFI(1), R.
ZINE(3)
(1) Laboratoire LGE, ENSET-Rabat, BP. 6207 Rabat-Instituts Maroc
(2) Research Center in Bioelectronics and Nanobioscience-University of Barcelona,
Spain
(3) Faculté des Sciences-Université Md. V Rabat
Le temps et les dépenses que les compagnies pharmaceutiques doivent
investir, pour introduire de nouveaux agents thérapeutiques dans
le marché, sont considérablement élevés. Les
autorités en charge de la santé publique en sont parfaitement
conscientes. Nous rappelons qu'en 1996, par exemple, le budget global
pour la recherche et le développement de nouveaux médicaments
était déjà de l'ordre de 30 milliards de dollars
! On estime aussi, que la période que nécessite la découverte
d'un nouveau traitement prend en moyenne jusqu'à 4 ans et peut
avoir, comme conséquence, l'examen de milliers de molécules
pour l'étude de leur toxicité. Ce qui explique le coût
et la limitation quantitative et qualitative en matière d'innovation
d'une nouvelle thérapie.
Le développement des biocapteurs constitue l'un des défis
les plus importants pour le vingt et unième siècle. Ce domaine
intéresse aujourd'hui de nombreux chercheurs opérant dans
l'environnement, le diagnostic clinique, l'industrie alimentaire etc.
L'objectif global de ce projet est d'explorer la possibilité de
développer des biocapteurs basés sur la microbalance en
cristal de quartz modifiée par transfert des films de
Langmuir-Blodgett de l'immunoglobuline G/amphiphile. Ces dispositifs (microbalance
en cristal de quartz (MCQ)), adaptés aux milieux liquides, donneront
un signal de réponse caractérisant les interactions entre
la couche sensible déposée sur la microbalance et les substances
biologiques à détecter.
Cette méthode de mesure directe est très intéressante
si on la compare aux essais colorimétriques classiques, telles
que l'analyse enzymatique, dans laquelle, plusieurs étapes très
lentes, sont nécessaires pour obtenir un signal exploitable.
La méthodologie proposée est basée sur l'exploitation
des mécanismes de l'interaction anticorps - antigènes ,
en utilisant une technique appropriée pour immobiliser les constituants
biologiques actifs.
Comme nous allons montrer, l'utilisation de la MBQ offre une détection
très sensible des constituants biologiques in situ, puisque la
fréquence d'oscillation dépend de la masse du cristal, en
diminuant proportionnellement à la masse. Par ailleurs, la réduction
du temps d'analyse permettra d'effectuer des mesures plus directes et
facilement exploitables.
Biotechnologies au Maroc. Conférences:
1. BIOTECHNOLOGIES ET SECURITE ALIMENTAIRE
- Biotechnologies. Défits et Opportunités
- Agro-alimentaire
- Agronomie
2. BIOTECHNOLOGIES ET SANTE
- Médicaments biothérapeutiques
3. BIOTECHNOLOGIES ET ENVIRONNEMENT:
- Biotechnologies et traitement des eaux
- Biotechnologies et Environnement
- Biotechnologies et traitement de déchets
Faculty of Sciences, Cadi Ayyad University
Marrakech, 40000, Morocco
Email: baaziz@uca.ac.ma
Phone: 212524434649 (post 513)
Fax: 212524434669