Les communications du workshop 'Biotechnologies au Maroc', Settat 2005, thème 'Biotechnologies et santé au Maroc' avaient couvert plusieurs sujets dont Type 1 Diabetes, simmondsin and oil of jojoba, activités des algues marines, aflatoxines alimentaires, l'enzyme Glycéraldéhyde-3-phosphate déshydrogènase (GAPDH), ..
The Insulin Gene and TNF Region in Type 1 Diabetes: Evidence for Linkage and Association in Moroccan Subjects
L. BOUQBIS 1, O. AKHAYAT 1, H. GARCHON 2, F. CALAFELL 3 & H. IZAABEL 1
(1): Laboratory of Cellular and Molecular Biology, University Ibnou-Zohr, Agadir,
Morocco.
(2): Institut National de Santé et de Recherche Medicale (INSERM)
U25, Hôpital Necker-Enfants malades, Paris, France.
(3): Facultat de Ciències de la Salut i de la Vida, Universitat
Pompeu Fabra, Barcelona, Catalonia, Spain
E-mail : BOUQBISL@yahoo.fr
One of the strongest contributors to genetic susceptibility to type 1 diabetes
(T1DM), after the major histocompatibility complex, is the IDDM2 region.
It was mapped to the insulin (INS) locus, located on chromosome 11p15.5.
We have investigated 123 sporadic T1DM patients and 119 healthy control
subjects from the Souss region of Morocco as well as 12 families with
multiple patients. Patient and control individuals were typed for the
-23 HphI, +805 DraIII, and +1121 PstI SNPs, and a random subsample was
also typed for the -356 VNTR polymorphism. Except for the -23 HphI and
+805 DraIII pair, all other polymorphisms were not in linkage disequilibrium,
contrary to what was found in other Caucasoid populations. Association
of size class I VNTR alleles with T1DM was confirmed. HLA-DR-specific
association of INS region polymorphisms with T1DM suggests an interaction
between HLA class II and the INS (IDDM2) region in the architecture of
genetic susceptibility to T1DM.
The contribution of single nucleotide polymorphisms in tumour necrosis factors
and to autoimmune diseases, and to type 1 diabetes mellitus (T1DM) in
particular, is not well established, and may be confounded by linkage
disequilibrium to class II HLA genes. At least two polymorphisms seem
to have functional relevance in the respective genes: TNFA-307 and TNFB+252.
We have typed these two polymporphisms in samples of Moroccan T1DM patients
and controls for which class II HLA genes had already been typed. TNF
and compound TNF-class II HLA haplotypes were inferred; it is the first
time that such a design is implemented. Independently of linkage disequilibrium
with class II HLA, TNF haplotype TNFA-307*2 - TNFB+252*2 showed a significant
protective effect (OR=0.031). Such effect could be detected because Morocco
shows the highest frequency of the TNFA-307*2 allele reported so far.
This highlights the possible population differences in alleles contributing
to autoimmune diseases.
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An easy and a practical process of extraction of simmondsin and oil in one step from jojoba seeds
A. BELLIROU 1, A. BOUALI 1, B. BOUAMMALI 2, N. BOUKHATEM 1 & A. BERRICI 3
1 Laboratoire de génétique
et de biotechnologies végétales, Faculté des sciences,
Université Mohamed I, Oujda, Maroc.
2 Laboratoire de photochimie et chimie macroMoléculaire, Faculté
des sciences, Université Mohamed I, Oujda, Maroc.
3 Laboratoire d'Aridoculture et d'Ecologie Végétale, Faculté
des sciences, Université Mohamed I, Oujda, Maroc.
The jojoba plant, simmondsia chenensis (link) Schneider, is a semi-arid evergreen shrub.
It grew wild in the desert south-western United States and North-western
Mexico. Now it is cultivated in other countries, such as, Argentina, Peru
and Morocco.
Approximately all simmondsin and oil can be easily removed in one step
by repeated extraction with water at 90°C from ground jojoba seeds.
The optimum time and temperature of extraction were respectively 1.5h
and 90°C. Quantitative analysis of simmondsin was made by HLPC.
EVALUATION IN VITRO DES POTENTIALITéS ANTIBACTéRIENNES ET ANTIFONGIQUES DES ALGUES MARINES (RHODOPHYCEAE) DES CôTES MAROCAINES
R. BOUHLAL & H. RIADI
Département de géologie, UFR : Sciences de la mer, Faculté des Sciences,
Université Abdelmalek Essaâdi.
Ce travail consiste à mettre en évidence l'action des extraits
algaux d'algues rouges (des côtes marocaines) sur des cultures bactériennes
et fongiques par des méthodes pharmaceutiques.
La méthode de diffusion consiste à mettre des disques (papier
Whatman) stériles imbibés par les extraits algaux dans les
boites de pétri qui sont déjà ensemencés par
les souches à testées.
la méthode de dilution : les dilutions sont préparées
dans des tubes stériles contenant le milieu de culture stérile,
ensuite ces tubes sont inoculés par la souche bactérienne,
et après on ajoute une quantité précise d'extraits
algaux.
Pour les deux méthodes, on fait une incubation pendant 24h à
37C° pour les bactéries et à 24C° pour la levure.
Dans la première méthode, l'activité antimicrobienne
se révèle par l'apparition des zones d'inhibition autour
des disques. Les résultats de l'inhibition sont exprimés
en mm en mesurant le diamètre d'inhibition qui se présente
comme une auréole claire qui entoure le disque.
Dans la deuxième méthode, les résultats sont réalisés
par la mesure de la densité optique à l'aide d'un spectrophotomètre
à une longueur d'onde de 570 nm.
Seize espèces d'algues rouges ont été collectées
dans quatre localités différentes du Détroit et de
la Méditerranée occidentale marocaine. Des extraits methanoliques
ont été obtenus et testés sur deux souches bactériennes
(Gram + et Gram-) et sur la levure.
L'évaluation de la bioactivité par la méthode de
diffusion sur disques de Ceramium rubrum, Callithamnion granulatum, Centroceras
clavulatum, Polysiphonia atlantica, Pterosiphonia fruticulosa,Halopitys
incurvus, Gelidium pusillum, Pterocladia capillacea, Gracilaria conferta,
Gracilaria multipartita, Plocamium coccineum, Hypnea musciformis, Gigartina
pistillata, Gigartina teedi, Sphaerococcus coronopifolius et Asparagopsis
armta a révélée que 11 espèces sont actives
au moins pour l'un des microorganismes. La plus forte inhibition, à
la fois antibactérienne et antifongique, est celle de Sphaerococcus
coronopifolius.
L'étude de l'effet de la variation du volume d'extrait sur les
bactéries en milieu liquide montre que la majorité des espèces
testées ont un effet inhibiteur sur la cinétique de croissance
bactérienne à partir de 200 µl.
Ce travail préliminaire possède comme originalité
la valorisation de la richesse algale de la région Nord, la recherche
d'alternatives aux antibiotiques commerciaux d'origines animales et chimiques.
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Développement
d'un système de " Clean-up " à double phase pour
la détermination fluorométrique des aflatoxines dans des échantillons
alimentaires
I. BOURAIS 1, A. AMINE 1, M. VENANZI 2, L. MICHELI 2, D. MOSCONE 2 & G. PALLESCHI
2
1 Faculté
des Sciences et Techniques de Mohammedia, Laboratoire des Analyses chimiques
et des Biocapteurs. Maroc
2Dipartimento di Scienze e Tecnologie Chimiche, Università di Roma
"Tor Vergata". Italie
Les mycotoxines, substances produites par les moisissures se développant
sur différents produits alimentaires (céréales, fruits,
lait), présentent des activités mutagènes et cancérogènes.
Parmi ces mycotoxines on retrouve les aflatoxines produites par différentes
espèces d'Aspergillus lors de conditions de stockage défectueuses
mais aussi durant la croissance des végétaux.
Du fait du danger que présente ce type de toxines pour la santé
de l'Homme, plusieurs travaux de recherches ont été réalisés
pour le contrôle des aliments à risque de contamination par
les aflatoxines même à très faible concentration.
Dans le même sens, notre groupe de recherche a développé
une nouvelle méthode de " clean-up " des aflatoxines
après leur extraction à partir des échantillons alimentaires.
Cette nouvelle technique repose sur la séparation des aflatoxines
par un système à double phase (phase aqueuse et phase organique).
Les aflatoxines sont extraites des aliments par une phase organique, qui,
mise en contact avec une phase aqueuse, permettra la diffusion des toxines
dans cette dernière phase. La concentration en aflatoxines est
finalement déterminée par fluorométrie à 350nm
( exc).
La technique " clean_up " développé pour l'analyse
des aflatoxines dans des échantillons alimentaires, s'est avérée
simple avec un temps d'analyse qui est relativement court mais surtout
sensible avec une limite de détection égale à 0.3
g/Kg (AFB1). Cette technique peut être également couplé
à d'autres techniques d'analyse notamment les techniques chromatographiques
pour une détermination individuelle de chaque type d'aflatoxine.
Etude de la Distribution de Six Microsatellites
dans la Population Marocaine : Application en Phylogénétique
et en Médecine Légale.
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S. CHADLI 1, A. LOUBBARDI 2, S. EL KHOULTI 2 & H. IZAABEL 1
1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences,
Université Ibn Zohr BP 8106 Cité Dakhla, Agadir Maroc.
2Laboratoire National de la Police Scientifique, 6 rue Ibnou Bouraid,
Quartier des Palmiers, Casablanca Maroc.
E-mail : schadli@caramail.com
Les Microsatellites ou les STRs (Short Tandem Repeated DNA) sont très
abondants dans le génome humain. Ils sont caractérisés
par un niveau de mutation extrêmement élevé et un
fort polymorphisme intra et inter - populationnel. Ces caractéristiques
font des microsatellites des marqueurs idéals pour révéler
le degré de divergences ou d'affinités génétiques,
établir les relations phylogénétiques entre les différentes
populations et définir une position anthropologique à la
population marocaine dans son contexte Méditerranéen. Ces
STRs sont également utilisés dans les identifications ou
les analyses en médecine légale. Dans ce travail, nous avons
analysé ces loci STRs (HUMTHO1, HUMFESFPS, HUMF13A1, HUMVWA, HUMTPOX,
HUMCSF1PO) afin de contribuer à l'établissement d'une base
de données sur la population du Maroc et explorer l'apport de ces
loci dans les études phylogénétiques.
Aucune déviation statistiquement, significative de l'équilibre
de Hardy Weinberg n'est observée. Les distances génétiques
sont calculées entre les différentes populations du pourtour
Méditerranéen sur la base des fréquences alléliques.
Les résultats de l'analyse, à travers les arbres phylogénétiques
et les analyses en composantes principales utilisées, montrent
une divergence génétique claire entre les populations marocaines
et celles Européennes.
Une contribution génétique sub-saharienne relativement basse
dans la population marocaine est mise en évidence. Ceci pourrait
être expliqué par les relations de migration d'individus
entre les populations Nord Africaines et Sub-sahariennes, dont l'histoire
garde des traces. Les méthodes statistiques utilisées, montrent
que les populations marocaines Arabes et Berbères se regroupent
et partagent un fond génétique Paléo Nord Africain
commun.
Activités
antimicrobiennes des algues marines (Chlorophyceae et Phaeophyceae)
I. CHIHEB & H. RIADI
Université
abdelmaalek esaadi, Faculté des sciences, Tétouan
Notre
travail est inscrit dans le cadre de la biotechnologie des algues marines
visant la caractérisation antibactériennes et antifongiques
des extraits de certaines espèces d'algues marines, ceci va nous
permettre d'une part de valoriser la richesse de la côte méditerranéenne
et de rechercher des substituants aux antibiotiques commerciaux d'origine
animal et chimique et d'autre part de créer à l'échelle
régionale d'une unité pilote dans ce domaine.
Dix neuf espèces d'algues (6 des Chlorophycées et 13 des
Phéophycées) ont été collectées dans
le Détroit de Gibraltar (Ksar sghir) et la Méditerranée
Occidentale (Smir, Martil et Amsa) du Maroc pour l'évaluation de
leur activité antibactérienne et antifongique.
Les extraits acètoniques de ces 19 espèces sont testés
sur des bactéries Gram négatives (Escherichia coli), Gram
positives (Listeria innocua) et une levure (Saccharomyces cerevisae) en
utilisant deux méthodes, la méthode de diffusion en disques
et la méthode de dilution.
Par
la méthode de diffusion en disques, les disques de papiers de filtre
stériles, imbibées auparavant par l'extrait algal sont déposées
à la surface d'un milieu de culture ont étaient entourées
après l'incubation par des halos clairs de diamètres variés
selon les germes et les espèces à tester.
- Six espèces des Chlorophycées (Enteromorpha intestinalis,
Enteromorpha ramulosa, Ulva lactuca, Codium tomentosum, Codium adhaerens
et Cladophora prolifera) sont actives contre Escherichia coli, une seule
espèce (Ulva lactuca) contre Listeria innocua et deux espèces
(Enteromorpha intestinalis et Enteromorpha ramulosa) contre Saccharomyces
cerevisae.
-Treize espèces de Phéophycées (Cladostephus spongiosus,
Halopteris scoparia, Dictyota linearis, Dictyopteris membranacea, Padina
pavonia, Colpomenia sinuosa, Phyllaria brevipes, Saccorhiza polyschides,
Fucus platycarpus, Sargassum vulgare, Cystoseira tamariscifolia, Cystoseira
mediterranea et Cystoseira usneoides) sont actives contre Escherichia
coli, 7 espéces (Cladostephus spongiosus, Dictyota linearis, Dictyopteris
membranacea, Padina pavonia, Fucus platycarpus , Cystoseira mediterranea
et Cystoseira usneoides) contre Listeria innocua et 6 espèces (Cladostephus
spongiosus, Dictyota linearis, Dictyopteris membranacea, Padina pavonia,
Fucus platycarpus, et Cystoseira usneoides) contre Saccharomyces cerevisae.
Par la méthode de dilution, l'inoculum des souches à tester
est distribué dans une série de tubes stériles qui
contient le milieu de culture et l'extrait algal à différents
volumes.
La mesure de la densité optique permet de suivre la croissance
des germes à étudier en présence des volumes progressifs
de l'extrait algal.
Pour chaque espèce d'algue testée, la densité optique
diminué progressivement que leur extrait augment, et par conséquent
la diminution de la croissance des germes à étudier.
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Utilisation
de Donax trunculus comme sentinelle pour l'évaluation de l'état
de santé des plages sableuses de la baie d'Agadir
F.
EL HAMIDI, A. BANAOUI, M. AZDI, A. KAAYA. & A. MOUKRIM 1
1Laboratoire
Eaux et Environnement, Departément de Biologie, Faculté
des Sciences, Université Ibn Zohr, B. P. 28/S, Dakhla 2060 Agadir,
Maroc. Tél. : +212.48.220957 Fax +212.48.220100 E-mail : fatelhamidi@yahoo.fr
Ce travail a porté sur l'étude de Donax trunculus comme espèce
sentinelle pour l'évaluation de l'état de santé des
plages sableuses de la baie d'Agadir.
Cette étude présente l'effet, sur certains paramètres
biochimiques (l'Acétylcholinéstérase, les Glutathion
S-Transférases, la Catalase et la peroxydation lipidique), de l'exposition
de Donax trunculus à des eaux et à des sédiments
prélevés de certains sites de la baie d'Agadir (Cap Ghir,
Anza, Port, Plage municipale d'Agadir et Oued Souss). Des dosages chimiques
des hydrocarbures aromatiques polycycliques, dans les sédiments
échantillonnées le long de la baie à différentes
profondeurs ont été réalisés. Ces sédiments
et les eaux prélevées de différents sites ont servi
par la suite à l'exposition de l'espèce. Les résultats
de l'analyse chimique des HAP dans les sédiments a classé
les deux sites du port et d'Anza comme pollués par les HAP comparativement
aux autres sites. Ceci est également confirmé par les analyses
biochimiques faites sur les échantillons exposés au sédiment.
Mais, cette contamination reste faible en se basant sur les normes de
la classification internationale. Cette différenciation des deux
sites d'Anza et du port est retrouvée également à
travers les expériences de contamination de Donax trunculus par
de l'eau et du sédiment récoltés de sites répartis
le long de la baie.
Ces résultats nous ont permis de montrer l'intérêt
de l'utilisation d'une approche multimarqueur chez Donax trunculus, et
de proposer cette espèce comme sentinelle pour la surveillance
de la contamination des côtes et particulièrement des plages
sableuses.
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Purification
et Caractérisation biochimique de l'enzyme Glycéraldéhyde-3-phosphate
déshydrogènase (GAPDH) de la levure Yarrowia lipolytica
L. FOURRAT 1, A. IDDAR 1, C. GANCEDO2 & A. SOUKRI 1
1- Unité de
génie enzymatique et Biologie Moléculaire, Laboratoire de
Biochimie, Faculté des Sciences Aïn-Chock, Université
Hassan-II, Casablanca, Maroc.
2- Unité de Biochimie et génétique des levures, Instituto
de Investigaciones Biomédicas Alberto SOLS, , madrid, Spain.
Yarrowia lipolytica
est une levure non conventionnelle de grand intérêt à
la fois fondamental et biotechnologique. Malgré cet intérêt,
il manque encore une connaissance approfondie de la régulation
d'une voie principale comme la glycolyse ; à peine on sait que
l'activité de l'Hexokinase est assez faible et fortement inhibée
par le Trehalose-6-phosphate ou que la Pyruvate Kinase présente
des caractéristiques cinétiques différentes de celles
de Saccharomyces cerevisiae.
Dans ce contexte, nous avons initié une étude de la Glycéraldéhyde-3-
Phosphate Déshydrogénase de Y. lipolytica (GAPDH, EC 1.2.1.12),
enzyme clé de la glycolyse qui catalyse la phosphorylation oxydative
du Glycéraldéhyde-3-Phosphate en 1,3-diphosphoglycérate.
Nous avons purifié cette enzyme d'après un protocole qui
comprend une précipitation au sulfate d'ammonium et une chromatographie
sur colonne de Bleu Cibacron. Nous avons obtenu une purification de 120
fois avec un rendement de 17%. D'après les études de spécificité
au cofacteur, l'enzyme est NAD-dépendante, elle a un pH optimale
de l'ordre de 7 et présente la particularité de rester stable
jusqu'à une température de 70ºC après incubation
de 10 min. L'enzyme a un poids Moléculaire natif de 132 kDa approximativement,
et celui de sous-unités est de 34 kDa ; ainsi, la GAPDH est vraisemblablement
homotétramérique.
Ce travail sera continué par l'étude approfondie des caractéristiques
de cette enzyme et l'étude des effets de l'interruption du gène
codant cette GAPDH sur le métabolisme de Yarrowia lipolytica.
Biotechnologies au Maroc. Conférences:
1. BIOTECHNOLOGIES ET SECURITE ALIMENTAIRE
- Biotechnologies. Défits et Opportunités
- Agro-alimentaire
- Agronomie
2. BIOTECHNOLOGIES ET SANTE
- Médicaments biothérapeutiques
3. BIOTECHNOLOGIES ET ENVIRONNEMENT:
- Biotechnologies et traitement des eaux
- Biotechnologies et Environnement
- Biotechnologies et traitement de déchets
Faculty of Sciences, Cadi Ayyad University
Marrakech, 40000, Morocco
Email: baaziz@uca.ac.ma
Phone: 212524434649 (post 513)
Fax: 212524434669