Biotechnologies. Anticorps recombinants (Articles de congrès)
مضادات الأجسام المؤتلفة


biochimie et biotechnologies' (thème du congrès de Marrakech 2004) couvre les résultats de plusieurs travaux de recheche portant, entre autres, sur: la production d'anticorps (antibodies, مضادات الأجسام).

Recombinant monoclonal antibody technique occurs by cloning antibody genes into high-yield expression vectors, which are introduced into expression hosts to generate recombinant antibodies. Recombinant antibodies overcome the limitations of other methods to produce antibodies. This biotech guarantees a long-term supply for these molecules.
تنتج تقنية إنتاج الأجسام المضادة أحادية النسيلة المؤتلفة عن طريق استنساخ جينات الجسم المضاد في نواقل التعبير عالية الإنتاجية ، والتي يتم إدخالها في مضيفات التعبير لتوليد أجسام مضادة مؤتلفة. تجتاز الأجسام المضادة المؤتلفة قيود الطرق الأخرى لإنتاج الأجسام المضادة. تضمن هذه التقنية الحيوية إمدادًا طويل الأجل لهذه الجزيئات.

Monoclonal C5-1 antibody produced in transgenic alfalfa plants exhibits a N-glycosylation that is perfect for glyco-engineering into human-compatible structures


luzerne

M. BARDOR1,2*, C. LOUTELIER-BOURHIS3, T. PACCALET1, P. COSETTE4, A-C. FITCHETTE1, L-P. VEZINA5, S. TREPANIER5, M. DARGIS5, R. LEMIEUX6, C. LANGE3, L. FAYE1 & P. LEROUGE1
1 CNRS-UMR 6037, 3 CNRS-UMR 6014 and 4 CNRS-UMR 6522, IFRMP 23, Université de Rouen, 76821 Mont Saint Aignan, France. 5 Medicago. inc., 1020, Route de l'église, Bureau 600, Sainte-Foy, Québec, Canada, 6 Héma-Québec, 2535, boulevard Laurier, Sainte-Foy, Québec, Canada. 2 Present address: University of California, San Diego, CA, USA.

Abstract: The perennial legume crop, Medicago sativa (alfalfa), benefits from several agronomic advantages such as the existence of agricultural infrastructures and the possibility to rapidly produce clonal transgenic populations, making it a good candidate for molecular farming applications. The expression of C5-1 monoclonal antibodies in this plant results in the production of a functional and fully assembled molecule, easily purified using a one-step procedure. Structural analysis of the plant-derived antibody show that the recombinant C5-1 bears N-glycans having a a(1,3)-fucose, a ß(1,2)-xylose and two terminal GlcNAc residues linked to the core Man3GlcNAc2. As a consequence, alfalfa plants have the ability to produce high yield of recombinant IgG harbouring a N-glycosylation that is perfect for in vitro or in vivo glycan remodeling into a human-compatible plantibody. For instance, as proof of concept, in vitro galactosylation of the alfalfa-derived C5-1 antibody results in a plantibody harbouring terminal ß(1,4)-galactose residues as observed in the mammalian IgG1.

Key words: alfafa (Medicago sativa), glyco-engineering, N-glycosylation, recombinant antibodies, transgenic plants.


Ingénierie et évaluation fonctionnelle d'un fragment d'anticorps recombinant (Fab) dirigé contre la toxine AahI de scorpion


J. MUZARD, N. AUBREY, P. BILLIALD
Laboratoire Lerai, USM 505, Muséum National d'Histoire Naturelle, 57, rue Cuvier, 75005 Paris, France. E-mail : julien.muzard@free.fr

Résumé:L'immunothérapie passive qui consiste à administrer à un patient des anticorps (ou fragments d'anticorps) immuns est le seul traitement spécifique des envenimations. Cette approche thérapeutique n'a pas connue de véritables améliorations depuis sa découverte (1896) et repose toujours sur l'utilisation de fragments d'anticorps (Fab ou F(ab)'2) polyclonaux équins (Toxicon, 2003, 41 : 541-57). Les anti-venins ainsi produits présentent de nombreux inconvénients liés d'une part à leur mode de préparation (hétérogénéité inter-lots ; risque de transmission d'agents infectieux ; faible concentration d'anticorps neutralisants) et d'autre part, aux risques toujours associés à l'administration de protéines hétérologues (réactions d'hypersensibilité).
Aujourd'hui, l'ingénierie Moléculaire et la bonne connaissance de la structure des anticorps permettent de concevoir de nouveaux formats d'anticorps thérapeutiques à potentiel évolutif. Plusieurs de ces molécules ont déjà été évaluées dans le laboratoire (FEBS Lett., 1999, 442 :183-8 ; Cell. Mol. Life Sci., 2003, 60 : 617-28).
A partir de l'hybridome 9C2 sécréteur d'une IgG murine neutralisant l'action de la toxine AahI du venin de scorpion Androctonus australis, nous avons construit un fragment d'anticorps de type Fab (rFab), produit par des bactéries et purifié par chromatographie sur gel d'agarose couplé à la protéine L. L'affinité de la protéine recombinante pour la toxine est très élevée (KD = 8,2 10-11 M), comparable à celle de l'anticorps naturelle. Le pouvoir neutralisant du rFab a également été évalué de façon comparative avec d'autres formats d'anticorps. Les résultats obtenus seront détaillés.
L'ingénierie Moléculaire offre la possibilité d'améliorer ou de moduler les caractéristiques fonctionnelles et structurales du fragment d'anticorps Fab, ce qui ne peut être envisagé pour les fragments d'anticorps produits par les méthodes conventionnelles (Fab et F(ab)'2).
Mots clés : Scorpion, Anticorps, Immunothérapie, Toxine, Fab.


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