Techniques: électrophorèse (isoenzymes, adn), chromatographie

Techniques de séparation et d'analyse d'utilisation fréquente en biotechnologies et étude de la diversité génétique (électrophorèse de l'ADN et isoenzymes, chromatographie, ..)
تقنيات الفرز والتحليل المستعملة في البيوتكنولوجيات القديمة والحديثة

Le développement des biotechnologies nécessitent des techniques de séparation et d'analyse; en particulier l'électrophorèse (كهرتهجير, electrophoresis).
Les méthodes de séparation en Biochimie exploitent les propriétés physico-chimiques des molécules. L'Electrophorèse fait appel essentiellement au caractère de l'ionicité des molécules qui est derrière l'apparition de charges électrique. La taille des molécules interfère avec la charge dans le processus de séparation.

EXTRACTION, PURIFICATION et ANALYSE PAR ELECTROPHORESE DE L'ADN

Extraction et purification de l'ADN (DNA) des foliole de palmier dattier :
homogénéisation du materiel végétal, déproteination, précipitation du DNA par l'alcool,...):

AMPLIFICATION PAR PCR DU DNA DE PALMIER DATTIER (Video): préparation du mélange reactionnel contenant le DNA, l'amorce, la Taq DNA polymerase, les dXTP et les autres réctifs. Il suit la polymerisation du DNA par PCR,....):

- ELECTROPHORESE DU DNA. PREPARATION DU GEL D'AGAROSE (Video: Agarose 1% coulée dans un moule pour minigels,...)

EXTRACTION, PURIFICATION et ANALYSE PAR ELECTROPHORESE DE L'ADN (suite)

ELECTROPHORESE DU DNA SUR GEL D'AGAROSE (Video: Préparation des échantillons, dépôt, migration et révélation par Bromure d'Ethidium, ...):

ELECTROPHORESE NON DENATURANTE SUR GEL DE POLYACRYLAMIDE et REVELATION DES ISOENZYMES

Préparation du support de migration constitué par le gel de polyacrylamide (11%, avec un gel de concentration à 5%), Dépôt des échantillons, lancement de l'électrophorèse :

Extraction et révélation des isoenzymes séparées par électrophorèse sur gel de polyacrylamide (Vidéo: Extraction des enzymes (homogéneisation et centrifugation, Révélation des isoenzymes après électrophorèse dans des conditions non dénaturantes):

Interprétation des zymogrammes. Exemple de la glutamate oxaloacétate transaminase (vidéo en Ar, Fr):

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AUTRES TECHNIQUES

CHROMATOGRAPHIE SUR PAPIER DES ACIDES AMINES
Dépôt de différents acides aminés sur papier, emplacement du support dans la cuve de migration et chromatographie, révélation des acides amines par pulvérisation de la ninhydrine

CHROMATOGRAPHIE SUR COUCHE MINCE DES LIPIDESVideo: Extraction des lipides du tournesol dans différents solvants, Centrifugation et dépôt sur la plaque de silice, Révélation avec vapeur d'iode

- Figuier de barbarie (cactus, Opuntia ficus indica L.). Croisement dirigé (vidéo):

- Pin d'Alep. Collection de populations de graines au Maroc (vidéo):

- Pin d'Alep. Etude de la diversité génétique des populations marocaines par le polymorphisme isoenzymatique à partir du mégagamétophyte(vidéo):

Voir Chaîne Youtube:http://www.youtube.com/c/baaziz

Useful links

- Techniques used in Biochemistry and Molecular biology analyzes
- Techniques d'électrophorèse
- Techniques d'isoenzymes (pdf)
- Marqueurs basés sur la PCR
- Application du marquage isoenzymatique chezlz palmier dattier. Travaux pratiques (TP)
- Téchniques utilisées en Biotechnologies

SUJETS/PLANTES

Palmier dattier نخيل التمر Date palm

Olivier Olivier الزيتون Olive

Pin Alep Pin d'Alep الصنوبر الحلبي Aleppo pine

Atriplex القطف Atriplex

Céréales الحبوب Cereals

Cactus Cactus الصبار Cactus

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OUVRAGES

400 QCM et Concours (Ar, Fr) sur Structure et Métabolisme des Sucres, M. Baaziz, 2018:
- Présentation du livre
- Affiche du Livre
Sucres